结缔组织病

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TUhjnbcbe - 2021/4/10 14:46:00

胆管癌是癌中之王,目前所有的治疗效果都不理想,预防癌症的发生应该引起足够的重视,特别是对这种恶性程度极高的癌症。但是预防不能使用*性过于强的药物,否则可能得不偿失,预防不成,带来祸患。氢气和某些安全的中医在预防癌症中当可发挥重要的作用,当然要证明确认对人类的这种预防作用,还需要人群流行病学数据,目前只是动物实验和概念探讨。氢气对癌症的作用,预防癌症有理论基础有研究证据,治疗癌症有初步研究证据,配合治疗有更多研究。癌症预防治疗研究,一定是氢气医学领域最活跃的方向。

胆管癌(cholangiocarcinoma)分为肝内、肝门部和肝外胆管癌,该类疾病早期难以发现、恶性程度高、治疗手段单一、预后极差。传统胆管癌的治疗手段主要是手术切除,辅助放疗和化疗,但效果不尽如意。胆管癌的发病因素较为复杂,但有一些非常相关的诱因,譬如胆管结石、华支睾吸虫、胆管囊性扩张症、原发性胆汁性肝硬化和致癌物刺激等。对于有潜在诱因的肿瘤(*曲霉*素也是导致该癌症的重要因素最*致癌物,看氢水怎么收拾它!),利用已知药物(如阿司匹林降低结直肠癌患病率)干预高风险人群,有望阻断或者减缓肿瘤发生。本研究利用硫代乙酰胺构建了肝内胆管癌动物模型,予以富氢水、金复康口服液或者两者联合干预,旨在探讨富氢水和/或金复康口服液能否阻断或者减缓胆管癌的发生。材料和方法1、动物与试剂30只6月龄SD雄性大鼠购自上海斯莱克实验动物有限公司[动物生产许可证号:SCXK(沪)-,使用许可证号:SYXK(沪)-],饲养于医院实验动物中心。硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)购自常州航宇医药技术开发有限公司(CAS号:-72-9);富氢水(hydrogen-richwater,H2)由上海舟朴医疗科技发展公司提供;金复康口服液(主要药物有*芪、北沙参、天门冬、麦冬、女贞子、绞股兰、淫羊藿、山萸肉、石见穿、石上柏、重楼等)由上海中医院肿瘤科提供(专利号ZL.9)。2、原位肝内胆管癌动物模型制作选取10只6月龄SD雄性大鼠根据文献构建胆管癌动物模型,配置TAA浓度为mg/L的饮用水,予以每天自由饮用,饲养于SPF级动物房,5个月后处死所有大鼠,麻醉后取出全部肝脏,肉眼观察肝脏表面和切面情况。选取典型病变区域,福尔马林固定、脱水、石蜡包埋、切片,苏木精-伊红(hematoxylin-eosinstaining,HE)染色,光学显微镜(OLYMPUS,BX53)下观察病理切片,人工评估肝脏病变。3、富氢水和/或金复康口服液实验组处理另外选取20只月龄SD雄性大鼠,在使用含TAA饮用水饲养的同时,一组(10只)予以2ml富氢水(1.8ng/L)胃内灌注,一组(5只)予以6ml/kg金复康口服液(JFK)胃内灌注,一组予以等量富氢水和金复康口服液胃内灌注。实验组周一至周五服用富氢水和/或金复康口服液,两日后进行下一周治疗。饲养5个月后,处死所有SD大鼠,取出肝脏,常规制成病理切片,光学显微镜下观察肝脏切面的肿瘤形成情况。4、大鼠肝功能检测在饲养5个月时处死大鼠过程中,通过大鼠腹主动脉收集大鼠血液,置于无抗凝剂添加管中,凝固后常温离心机上r/min,离心5min收集血清。新医院检验科全自动生化分析仪上检测ALT和AST水平。5、统计学处理采用SPSS18.0软件和GraphpadPrism5进行数据处理,数据采用单因素方差分析和重复测量方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义。结 果1、TAA诱导模型大鼠肝内胆管癌发生率和病变特点在饮用含TAA水5个月时间内,未见TAA相关性死亡,但1只由于灌胃导致窒息死亡。TAA喂养5个月时SD大鼠肝脏明显萎缩、呈枯*色、表面呈细颗粒状,肝脏表面和切面散在分布大小不等的灰白色瘤结节,镜下可见部分区域胆管细胞异型增生,合并侵袭性肝内胆管癌形成。肿瘤表现为中分化腺癌,伴有腺腔内坏死和大量间质增生(图1A和1B)。除此之外,肝脏病变还具有肝硬化的相应特征:模型肝脏边缘呈波浪状、肝细胞空泡变性、汇管区大量结缔组织增生和炎症细胞浸润(图1A和1C)。TAA诱导9只大鼠肝内胆管癌成瘤率为%。2、实验组大鼠肝内胆管癌发生率干预5个月后,处死大鼠并取出肝脏,结果显示富氢水组肝内胆管癌或疑似肿瘤的发生率57.1%(4/7),金复康口服液组大鼠肝内胆管肿瘤的成瘤率为40%(2/5),富氢水联合金复康口服液干预组大鼠肝内胆管成瘤率为0(0/5),我们进而比较了各组肿瘤个数的差异,富氢水组和联合组的个数显著低于对照组,但JFK组和对照组间差异不显著(图2和图3)。富氢水组3只大鼠由于操作失误窒息而死,余及金复康口服液以及联合用药组用药过程中未见药物所致的大鼠死亡。表明富氢水和/或金复康口服液长期使用未产生严重不良反应,包括大鼠体重变化未见任何差别(图4)。3、四组大鼠肝脏功能指标比较第5个月处死大鼠之前,收集各组大鼠血清样本,检测AST和ALT的水平。如图5显示,各组AST和ALT的表达水平没有明显差异。讨 论中国恶性肿瘤包括胆管癌的发病率逐年攀升,人口老龄化加剧和环境污染是两个重要因素。传统的治疗手段如手术、放疗和化疗等并不能够延长胆管癌患者的生存时间。《*帝内经·素问·四气调神论》篇说到“是故圣人不治已病治未病,不治已乱治未乱,此之谓也”,这段话着重强调了治未病的重要性,指明了预防医学的发展方向。本研究前期成功建立了肝内胆管癌动物模型,该模型由TAA长期诱导,最终会出现肝癌和/或胆管癌。该模型的病变特点和人类肝硬化和肝门部胆管癌非常类似。其特征表现为病变区域炎性细胞浸润,肝细胞气球样变,纤维组织增生,形成纤维间隔,肿瘤细胞分化较好,形成腺腔样结构。该模型是研究胆管癌发生机制和进行预防和治疗的理想平台。中药金复康是治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的一种有价值的药物,体外实验显示JFK调节多个癌症相关基因位点的组蛋白修饰发挥其抗癌活性和激活Fas和DR4诱导肺癌细胞凋亡等。本研究首次探讨了JFK在胆管癌预防中的作用,结果显示JFK能够减少TAA诱导的肝内胆管癌60%的发生率,而未经处理组肝内胆管癌发生率高达%。同时未见JFK相关的并发症,而且与对照组相比,肝功能未见明显异常。上述数据初步证明JFK的长期应用在一定程度上有助于阻断TAA诱发的胆管癌。用于化学预防的药物特点必须是安全、有效、无*副作用、可长期使用。除了目前常见的药物如阿司匹林、二甲双胍和中药外,我们引入了一个新的物质:氢。氢气是分子量最小的气体,氢的使用与多种疾病如代谢综合征、糖尿病、线粒体和炎性肌病以及肿瘤等密切相关。在肿瘤防治领域,氢气也发挥了重要作用。细胞实验显示氢气能够抑制肺癌和卵巢癌细胞的增殖。动物实验显示氢气能够预防肾癌、肝癌和肠癌等肿瘤的发生。此外,氢气能够减轻放化疗*副作用和增强抗癌药物疗效。本研究首次探讨了氢气在胆管癌预防中的作用,结果显示富氢水单独使用能够减少42.9%胆管癌的发生率,明显低于未处理组胆管癌%的发生率,且肿瘤数目也显著下降。同时,富氢水干预未导致治疗所致的明显并发症,提示富氢水的长期饮用有助于预防肝内胆管癌的发生。鉴于JFK和氢气均不能够完全控制TAA诱导的肝内胆管癌发病,而氢和中药均能够减少炎症因子TNFa和IL-6的表达。那么两者联合使用是否会起到1+1大于2的效果呢?本研究首次将氢气与中医药相结合用于预防胆管癌的发生,结果显示所有的大鼠(5/5,%)均未形成胆管癌,说明氢+中药的联合应用能够阻断TAA所致的肝内胆管癌的发生。氢气是如何协同JFK发挥作用的呢?在中药处方中存在“君臣佐使”的配伍,而氢气在与中药联用时起到“佐药”的作用,即改善肝肾功能、减轻君药和臣药的*副作用,同时协同抗炎抗氧化、增强了君药和臣药的治疗效果。然而,氢与中医药的协同作用的效果还需要大样本动物实验和临床试验加以验证,同时氢的作用机理还需要通过进一步研究。本研究创造性的提出了“氢联合中医药用于肿瘤防治”的学术观点,并通过动物实验证明了氢气与中药的联合应用减少了TAA诱导的胆管癌发生,这一方法有望开辟中医药学在癌症预防中的新领域。

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